Plásmido Doble Nickase (h) ZNF322A: sc-417187-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZNF322A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZNF322A (h) y el plásmido de doble nickasa ZNF322A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZNF322. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZNF322A | sc-417187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZNF322A | sc-417187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF322 (ZNF322A) codifica un factor de transcripción humano de dedos de zinc C2H2 que contiene un dominio KRAB, implicado en la unión al ADN específica de secuencia y en programas de represión transcripcional que configuran el estado celular y la expresión génica sensible al estrés. Las funciones descritas vinculan a ZNF322A con la regulación de redes transcripcionales asociadas a proliferación, supervivencia y motilidad, en consonancia con papeles en el control de vías de señalización aguas abajo dependiente de la cromatina. La expresión desregulada de ZNF322A se ha asociado con fenotipos oncogénicos en múltiples contextos, incluidos programas epiteliales alterados y firmas relacionadas con la invasión. Como proteína reguladora nuclear, es un objetivo útil para desentrañar la circuitería transcripcional, el control génico dependiente de la cromatina y la reprogramación de vías en modelos relevantes para la enfermedad.
ZNF322A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZNF322 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZNF322. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZNF322. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZNF322 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.