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WDR5慢病毒激活颗粒(m2) | sc-431247-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠Wdr5基因编码WDR5,这是一种保守的WD40重复支架蛋白,是SET/MLL家族组蛋白H3K4甲基转移酶复合体的核心组分,能够协调与染色质相关的组装因子以调控转录程序。WDR5通过对启动子与增强子的调控来支持基因表达的表观遗传控制,进而影响细胞周期进程、谱系决定和发育模式形成,并与更广泛的染色质重塑及RNA加工网络发生互作。WDR5依赖的染色质状态一旦失调,往往与癌症及其他由表观遗传驱动的疾病中观察到的分化异常和增殖表型改变相关,因此Wdr5成为开展转录调控机制研究的重要靶点。在小鼠模型中对Wdr5进行基因编辑,可用于对H3K4甲基化通路进行功能解析,绘制COMPASS/MLL复合体内的蛋白—蛋白相互作用图谱,并研究其在不同情境下对干细胞生物学与组织稳态的特异性影响。
WDR5 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Wdr5 表达。
WDR5 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Wdr5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性WDR5表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Wdr5 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。