Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) WDR5: sc-402425-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)WDR5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa WDR5 (h) y el plásmido de doble nickasa WDR5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a WDR5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: WDR5 Anticuerpo (G-9): sc-393080
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) WDR5 | sc-402425-NIC | 20 µg | $410.00 |
WDR5 (dominio de repeticiones WD 5) codifica una proteína andamiaje central asociada a la cromatina que se une a la histona H3 y coordina el ensamblaje de los complejos COMPASS/MLL responsables de la metilación de H3K4 en promotores activos. A través de estas interacciones, WDR5 regula programas transcripcionales que controlan la progresión del ciclo celular, la especificación de linaje y el mantenimiento de estados similares a los de las células madre, y también se relaciona con la elongación transcripcional de la ARN polimerasa II y la función de los potenciadores (enhancers). WDR5 participa en la comunicación epigenética cruzada con la expresión génica dependiente de MYC y con otros reguladores de la cromatina que determinan la accesibilidad global de la cromatina. La desregulación del remodelado de cromatina ligado a WDR5 y de la metilación de H3K4 se ha asociado con una expresión alterada de genes del desarrollo y con circuitos transcripcionales oncogénicos en múltiples contextos de enfermedad.
WDR5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus WDR5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de WDR5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de WDR5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con WDR5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.