Tyro3 Plasmide Double Nickase (h): sc-401412-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Tyro3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Tyro3 Double Nickase Plasmid (h) e il Tyro3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TYRO3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Tyro3 Antibody (A-7): sc-166359
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Tyro3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401412-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tyro3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401412-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **TYRO3** codifica Tyro3, una tirosin-chinasi recettoriale della famiglia TAM che viene attivata dai ligandi **GAS6** e **PROS1**, spesso in cooperazione con la fosfatidilserina presente sulle cellule apoptotiche. La segnalazione di Tyro3 coinvolge le vie **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** e **JAK/STAT** per regolare sopravvivenza cellulare, proliferazione, migrazione e l’attenuazione delle risposte immunitarie innate, inclusi effetti sulla rimozione fagocitica del materiale apoptotico. Nel sistema nervoso è stata collegata al supporto neuronale e all’omeostasi sinaptica, mentre in ambito immunitario contribuisce alla risoluzione dell’infiammazione. Un’attività o un’espressione disregolata di TYRO3 è stata associata a programmi di segnalazione oncogenici, ad alterazioni delle interazioni tumore–sistema immunitario e a fenotipi rilevanti per patologie infiammatorie o neurodegenerative.
Tyro3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TYRO3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TYRO3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TYRO3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TYRO3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.