Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) TTP: sc-423781-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TTP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TTP (m) y el plásmido de doble nickasa TTP (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Zfp36. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TTP Anticuerpo (A-8): sc-374305
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TTP | sc-423781-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Zfp36 en ratón codifica la tristetraprolina (TTP), una proteína de unión a ARN que reconoce elementos ricos en AU y que promueve la desadenilación y la degradación de ARNm inestables, incluidos muchos transcritos de citocinas y de respuesta inmediata. Al reclutar el complejo desadenilasa CCR4–NOT y modular la regulación génica postranscripcional, TTP moldea las salidas de señalización inflamatoria aguas abajo de vías como TNF/NF-κB y MAPK/p38. La alteración de la actividad de Zfp36/TTP se asocia con una homeostasis de citocinas desregulada y fenotipos inflamatorios, y se estudia con frecuencia en el contexto de la activación de células inmunitarias, las respuestas de macrófagos y la remodelación del transcriptoma inducida por el estrés. Como nodo en las redes de recambio de ARNm, TTP ofrece un punto de entrada manejable para dilucidar cómo la estabilidad del ARN controla programas de expresión génica relevantes para la patología asociada a la inflamación.
TTP El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Zfp36 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Zfp36. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Zfp36. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Zfp36 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.