Tris Acetate-EDTA buffer, 50X

El tampón Tris Acetato-EDTA (TAE), comúnmente conocido en su forma concentrada como 50X TAE, es una solución tampón muy utilizada en biología molecular, especialmente para la separación electroforética de ácidos nucleicos. Este tampón está compuesto por una mezcla de base Tris (Tris(hidroximetil)aminometano), ácido acético y EDTA (ácido etilendiaminotetraacético). La función principal del tampón TAE es mantener un pH estable durante la electroforesis, lo que es crucial para la migración consistente del ADN a través de geles de agarosa. El tampón TAE facilita el movimiento del ADN bajo un campo eléctrico al proporcionar iones que transportan la corriente y ayudan a estabilizar el entorno de carga alrededor de las moléculas de ADN. El componente EDTA del tampón actúa como agente quelante; une iones metálicos divalentes como Mg²⁺ y Ca²⁺, que son cofactores necesarios para las nucleasas. Al secuestrar estos iones, el EDTA inhibe la actividad enzimática que, de otro modo, podría degradar los ácidos nucleicos durante el proceso de electroforesis. Las aplicaciones de investigación del tampón TAE no se limitan a la simple electroforesis en gel del ADN. También se emplea en técnicas de biología molecular más matizadas, como la electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE) y la electroforesis en gel de inversión de campo (FIGE), en las que su capacidad amortiguadora ayuda a gestionar los cambios de orientación e intensidad del campo eléctrico, favoreciendo así la separación de fragmentos de ADN muy grandes. La capacidad tampón ligeramente inferior de TAE en comparación con otros tampones como TBE (Tris-Borato-EDTA) puede ser ventajosa en estas aplicaciones porque permite una mejor resolución de fragmentos de ADN más grandes a costa de requerir una recirculación más frecuente del tampón para evitar cambios de pH durante series prolongadas.