Tris Acetate-EDTA buffer

El tampón Tris Acetato-EDTA (TAE) es un reactivo fundamental en la investigación en biología molecular, utilizado principalmente en la electroforesis de ácidos nucleicos y en el análisis en gel de ADN/ARN. Este tampón está meticulosamente formulado para proporcionar las condiciones óptimas para la separación y visualización de fragmentos de ácido nucleico en función de su tamaño. La composición del tampón TAE suele incluir tres componentes principales: Tris(hidroximetil)aminometano (Tris), ácido acético (acetato) y ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). El Tris actúa como agente tampón, manteniendo un pH estable en torno a 8,0, lo que favorece la estabilidad del ADN y el ARN y la electroforesis. El ácido acético actúa como contraión, proporcionando conductividad a la solución tampón. El EDTA quela los cationes divalentes, como los iones de magnesio, que de otro modo podrían favorecer las interacciones inespecíficas de los ácidos nucleicos o ser degradados por las nucleasas. En investigación, el tampón TAE se utiliza habitualmente en la electroforesis en gel de agarosa para separar fragmentos de ADN generados por digestión con enzimas de restricción, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) u otras técnicas de manipulación de ácidos nucleicos. La capacidad amortiguadora y la fuerza iónica del tampón permiten una migración eficaz de los fragmentos de ácido nucleico a través de la matriz del gel bajo la influencia de un campo eléctrico. Tras la electroforesis, las bandas de ADN o ARN pueden visualizarse mediante colorantes fluorescentes, bromuro de etidio u otras tinciones de ácidos nucleicos. Además, el tampón TAE es esencial en las técnicas de purificación de ácidos nucleicos, como la extracción en gel, donde se utiliza para solubilizar fragmentos de ADN o ARN de geles de agarosa para aplicaciones posteriores. Los esfuerzos de investigación en curso se centran en optimizar las formulaciones del tampón TAE para aplicaciones específicas y explorar su compatibilidad con técnicas emergentes de análisis de ácidos nucleicos, como la secuenciación de nueva generación y la PCR digital.