TRAP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402963

Descripción general

TGFBRAP1 codifica la proteína 1 asociada al receptor del factor de crecimiento transformante beta (TRAP-1), un adaptador citoplasmático implicado en la modulación de la señalización de la superfamilia TGF-β. Se ha descrito que TRAP-1 se asocia con componentes del complejo del receptor de TGF-β e influye en las respuestas transcripcionales dependientes de SMAD aguas abajo, que regulan la proliferación, la diferenciación, la remodelación de la matriz extracelular y programas génicos relacionados con la inmunidad. Por su papel en la configuración de la salida de la vía y de eventos próximos al receptor, TGFBRAP1 se estudia en el contexto del crosstalk de señalización y de las transiciones de estado celular. La regulación alterada de la vía de TGF-β es ampliamente relevante para la fibrosis, la biología del cáncer y los mecanismos de enfermedades inflamatorias, lo que convierte a TRAP-1 en un objetivo útil para estudios mecanísticos de vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TRAP-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TGFBRAP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TGFBRAP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TGFBRAP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TRAP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TGFBRAP1 para la investigación de la señalización de TRAP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TGFBRAP1 críticos para la función de TRAP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TGFBRAP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TRAP-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TRAP-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TGFBRAP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TRAP-1 (h) y el plásmido HDR TRAP-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TGFBRAP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TGFBRAP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.