Partículas Lentivirales de Activación (h) TRα: sc-401475-LAC

THRA codifica el receptor alfa de la hormona tiroidea (TRα), un receptor nuclear activado por ligando que se une a la triyodotironina (T3) y regula la transcripción mediante elementos de respuesta a la hormona tiroidea. TRα coordina programas génicos del desarrollo y del metabolismo al modular la accesibilidad de la cromatina y el reclutamiento de corre reguladores, influyendo en procesos como la diferenciación celular, la bioenergética mitocondrial y el control del ciclo celular. Como nodo central de la señalización de la hormona tiroidea, THRA contribuye a la capacidad de respuesta endocrina específica de tejido y al “crosstalk” con las vías MAPK/PI3K y de receptores de retinoides. La señalización desregulada de TRα o la función alterada del receptor es relevante para fenotipos endocrinos y metabólicos y puede afectar programas de especificación de linaje estudiados en modelos de investigación del neurodesarrollo y cardiometabólicos.

Las partículas de activación lentiviral TRα (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de THRA en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TRα (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción THRA, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TRα. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo THRA y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.