TorsinB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407379

Visão geral

TOR1B codifica a TorsinB, uma ATPase AAA+ localizada no retículo endoplasmático e no espaço perinuclear, que contribui para o controle de qualidade de proteínas e para a manutenção da arquitetura do envelope nuclear. A TorsinB participa de processos ligados à homeostase do RE, à remodelação de membranas e à regulação da biogênese do complexo do poro nuclear, frequentemente com sobreposição funcional com outros membros da família das torsinas. A disrupção de vias mediadas por torsinas pode perturbar o acoplamento núcleo-citoesquelético e as respostas celulares ao estresse, tornando o TOR1B relevante para estudos de função neuronal e da biologia de distúrbios do movimento. Como um gene humano com funções na interface RE–envelope nuclear, o TOR1B é frequentemente investigado em modelos que avaliam proteostase, mecanotransdução e integridade de organelas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TorsinB (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TOR1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TOR1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TOR1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TorsinB.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TOR1B para a investigação da sinalização de TorsinB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TOR1B críticos para a função TorsinB
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TOR1B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TorsinB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TorsinB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TOR1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TorsinB Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TorsinB (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TOR1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TOR1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.