Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Topo IIβ Productos CRISPR Knockout y Activación (m)
- Target species: mouse; for corresponding human product, see Topo IIβ CRISPR Plasmids (h)
- Los plásmidos consisten en Topo IIβ una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Target-specific CRISPR Plasmids for both gene knockout and activation are available. Please refer to the detailed product information in the tabs below
- El knockdown y la activación génica pueden comprobarse utilizando: Topo IIβ Anticuerpo (A-12): sc-365071
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Plásmidos Doble Nickase
Plásmido Activador CRISPR
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Los plásmidos RISPR/Cas9 KO, Plásmidos Doble Nickase y Plásmidos de Activación CRISPR/dCas9 se consideran productos "Licensed Product" y se utilizarán de acuerdo con la Licencia/Etiqueta Limitada haga click aquí.
Description
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Topo IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una Topo IIβ- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
- Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
- Para seleccionar las células que contienen un doble corte producido por Cas9, se recomienda la co-trasnfección con Topo IIβ Plásmido HDR (m) (sc-423470-HDR)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Topo IIβ Anticuerpo (A-12): sc-365071
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Topo IIβ Plásmido HDR (m) está recomendado para co -transfectar con Topo IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
- Topo IIβ Plásmido HDR (m) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por Topo IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
- Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
- Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
- La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Topo IIβ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (m2 )Topo IIβ son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (m)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Topo IIβ Anticuerpo (A-12): sc-365071
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Productos Relacionados
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (m) Topo IIβ es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (m) Topo IIβ incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Topo IIβ Anticuerpo (A-12): sc-365071
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- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) Topo IIβ es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (m) Topo IIβ incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- El ARN guía de las Partículas Lentivirales de Activación (m2) Topo IIβ codifica una secuancia diana especifica de 20 nt, que es diferente del ARN guia de Partículas Lentivirales de Activación (m)
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Topo IIβ Anticuerpo (A-12): sc-365071
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Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Topo IIβ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423470 | 20 µg | $390.00 | |||
Topo IIβ Plásmido HDR (m) | sc-423470-HDR | 20 µg | $437.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m) Topo IIβ | sc-423470-NIC | 20 µg | $402.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Topo IIβ | sc-423470-NIC-2 | 20 µg | $402.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (m) Topo IIβ | sc-423470-ACT | 20 µg | $390.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (m2) Topo IIβ | sc-423470-ACT-2 | 20 µg | $390.00 | |||
Partículas Lentivirales de Activación (m) Topo IIβ | sc-423470-LAC | 200 µl | $447.00 | |||
Partículas Lentivirales de Activación (m2) Topo IIβ | sc-423470-LAC-2 | 200 µl | $447.00 |