Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) TMTC3: sc-409056-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TMTC3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TMTC3 Double Nickase (h) et le plasmide TMTC3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TMTC3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TMTC3 Antibody (G-9): sc-398137
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TMTC3 | sc-409056-NIC | 20 µg | $410.00 |
TMTC3 code une protéine transmembranaire à répétitions tétratricopeptidiques résidente du réticulum endoplasmique (RE), impliquée dans le contrôle qualité des protéines et la maturation des glycoprotéines, notamment via la régulation de l’O‑mannosylation de certains substrats. Par son rôle dans la protéostasie du RE, TMTC3 influence le repliement, le trafic et la stabilité des protéines membranaires et sécrétées, en interagissant avec des voies telles que la signalisation du stress du RE et la modulation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR). Des études génétiques et fonctionnelles ont associé des altérations de TMTC3 à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des perturbations de l’homéostasie cellulaire compatibles avec un défaut de traitement des protéines. En conséquence, TMTC3 est fréquemment étudié dans des modèles de développement neuronal, de maturation des récepteurs d’adhésion et de signalisation, ainsi que dans des voies associées au RE pertinentes pour les mécanismes des maladies congénitales et neurologiques.
TMTC3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TMTC3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TMTC3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TMTC3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TMTC3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.