Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLX2 (m): sc-423424
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TLX2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TLX2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TLX2 Antibody (D-12): sc-514077
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TLX2 (m) | sc-423424 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Tlx2 code le facteur de transcription à homéoboîte TLX2 (également appelé HOX11L1), un régulateur nucléaire impliqué dans la spécification de la lignée neuronale et la maturation au cours du développement. TLX2 influence des programmes d’expression génique qui coordonnent la différenciation, la migration et la connectivité au sein des systèmes nerveux périphérique et central, en interaction avec des réseaux développementaux plus larges contrôlés par des gènes à homéoboîte. Dans des modèles murins, une activité altérée de TLX2 a été associée à des anomalies de la formation du système nerveux entérique et du développement des neurones autonomes, le reliant à des voies impliquées dans la motricité intestinale et des phénotypes neurodéveloppementaux. Ces caractéristiques font de TLX2 un nœud utile pour étudier le contrôle transcriptionnel du développement neural et les circuits effecteurs en aval.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TLX2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Tlx2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Tlx2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Tlx2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TLX2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Tlx2 pour l'étude de la signalisation de TLX2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Tlx2 essentiels à la fonction de TLX2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Tlx2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TLX2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TLX2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Tlx2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TLX2 plasmide HDR (m) et le TLX2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Tlx2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Tlx2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.