TIMP-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400408-LAC

TIMP1 kodiert den Gewebeinhibitor von Metalloproteinasen‑1 (TIMP‑1), ein sezerniertes Glykoprotein, das an mehrere Matrix‑Metalloproteinasen bindet und diese hemmt, um den Umsatz der extrazellulären Matrix (ECM) und die perizelluläre Proteolyse zu regulieren. Durch die Modulation der MMP‑Aktivität beeinflusst TIMP‑1 Zellmigration, Adhäsion und Gewebeumbau – Prozesse, die sich mit inflammatorischer Signalgebung, angiogenen Programmen und Wundheilungsreaktionen überschneiden. TIMP‑1 trägt außerdem zum Gleichgewicht zwischen Proteasen und Inhibitoren bei, das die ECM‑abhängige Signalübertragung prägt, und kann die Verfügbarkeit von Zytokinen sowie die Bioaktivität von Wachstumsfaktoren beeinflussen. Eine dysregulierte TIMP1‑Expression wurde mit Fibrose, neuroinflammatorischen Kontexten und dem Umbau des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in mechanistischen Studien zur ECM‑Dynamik und zu Zell‑Matrix‑Interaktionen unterstützt.

TIMP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TIMP1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TIMP-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TIMP1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TIMP-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TIMP1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.