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TFII-I双切口酶质粒(h) | sc-403153-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFII-I双切口酶质粒(h2) | sc-403153-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF2I 编码 TFII-I,这是一种多功能转录因子。它通过结合启动子元件,将信号依赖性的输入与基因表达程序相耦联,并整合对钙信号和生长因子有反应的通路。TFII-I 参与即时早期基因的调控、细胞周期与分化程序,并有助于协调转录过程与核内信号复合体之间的配合。GTF2I 活性与剂量的改变已与神经发育表型和免疫相关的转录状态联系在一起;而反复出现的遗传改变也提示,依赖 TFII-I 的网络参与了与疾病相关的调控重塑。这些特征使 TFII-I 成为解析人类细胞中转录控制、刺激应答型基因调控以及情境特异性调控回路的一个有用关键节点。
TFII-I 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GTF2I 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GTF2I内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GTF2I的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GTF2I基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。