Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) TCP-1 ζ: sc-403047-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)TCP-1 ζ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TCP-1 ζ (h) y el plásmido de doble nickasa TCP-1 ζ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCT6A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) TCP-1 ζ | sc-403047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) TCP-1 ζ | sc-403047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCT6A codifica la subunidad humana TCP-1 ζ (zeta) del complejo chaperonina TRiC/CCT, una máquina de plegamiento dependiente de ATP que ayuda a la maduración de un amplio espectro de proteínas citosólicas. TRiC/CCT mantiene la proteostasis al favorecer el plegamiento correcto de la actina, la tubulina y otros clientes complejos de múltiples dominios, lo que repercute en la organización del citoesqueleto, la progresión del ciclo celular y la adaptación al estrés. Al influir en la estabilidad y el ensamblaje funcional de proteínas clave de señalización y estructurales, TCP-1 ζ vincula el plegamiento mediado por chaperonas con vías que regulan la proliferación y la homeostasis celular. La desregulación de componentes de TRiC/CCT, incluido CCT6A, se ha investigado en contextos de desequilibrio de la proteostasis y fenotipos de crecimiento aberrantes relevantes para la investigación del cáncer y la neurodegeneración.
TCP-1 ζ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCT6A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCT6A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCT6A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCT6A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.