Tankyrase-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403925

Descripción general

TNKS2 codifica la tankirasa-2, una poli(ADP-ribosa) polimerasa de la familia PARP que regula la estabilidad de proteínas y la señalización mediante el recambio dependiente de la PARilación. La tankirasa-2 favorece la degradación de sustratos mediada por ubiquitina, como AXIN, modulando así la actividad de la vía Wnt/β-catenina y los programas transcripcionales posteriores que controlan la proliferación y la diferenciación. También contribuye al mantenimiento de los telómeros mediante su interacción con TRF1 e influye en la progresión mitótica y la organización del huso. La actividad desregulada de la tankirasa se ha vinculado con una señalización Wnt aberrante y con defectos en el mantenimiento del genoma relevantes para la transformación oncogénica y otras patologías proliferativas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Tankyrase-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TNKS2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TNKS2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TNKS2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Tankyrase-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TNKS2 para la investigación de la señalización de Tankyrase-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TNKS2 críticos para la función de Tankyrase-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TNKS2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Tankyrase-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Tankyrase-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TNKS2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Tankyrase-2 (h) y el plásmido HDR Tankyrase-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TNKS2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TNKS2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.