Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
T3JAM Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405338
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- T3JAM El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico T3JAM, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: T3JAM Anticuerpo (B-7): sc-398781
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
T3JAM Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405338 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TRAF3IP3 (T3JAM) es una proteína tipo adaptadora implicada en la señalización de células inmunitarias, que conecta eventos proximales al receptor con cascadas de quinasas aguas abajo que configuran programas de activación, supervivencia y diferenciación. Se ha asociado con la regulación de procesos relacionados con MAPK y NF-κB y puede influir en las salidas transcripcionales durante el desarrollo de linfocitos y la señalización del receptor de antígeno. La expresión o función alterada de TRAF3IP3 se ha estudiado en el contexto de una señalización inflamatoria desregulada y de vías asociadas a neoplasias hematológicas, donde los cambios en el equilibrio de las vías pueden afectar la proliferación celular y la apoptosis. Estas propiedades hacen de TRAF3IP3 un objetivo útil para analizar la integración de señales en sistemas modelo hematopoyéticos y de origen inmunitario.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO T3JAM (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TRAF3IP3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TRAF3IP3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TRAF3IP3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína T3JAM.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TRAF3IP3 para la investigación de la señalización de T3JAM, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TRAF3IP3 críticos para la función de T3JAM
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TRAF3IP3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido T3JAM CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido T3JAM CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TRAF3IP3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR T3JAM (h) y el plásmido HDR T3JAM (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TRAF3IP3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TRAF3IP3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.