Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
T-type Ca++ CP α1H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401147
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T-type Ca++ CP α1H O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico T-type Ca++ CP α1H, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:T-type Ca++ CP α1H Anticorpo (G-10): sc-377510
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T-type Ca++ CP α1H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401147 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CACNA1H codifica a subunidade formadora de poro α1H do canal de cálcio do tipo T CaV3.2, que medeia o influxo de Ca2+ ativado por baixos potenciais, moldando a excitabilidade da membrana, a atividade marcapasso e a regulação gênica dependente de cálcio. Ao controlar oscilações sub-limiar e transientes intracelulares de Ca2+, o CaV3.2 integra-se a processos de sinalização que influenciam a liberação de neurotransmissores, a secreção hormonal e programas de transcrição dependentes da atividade. Alterações na função de CACNA1H têm sido implicadas em distúrbios de excitabilidade, incluindo suscetibilidade à epilepsia, mecanismos de dor neuropática e fenótipos de ritmo cardíaco, e também são estudadas em contextos de proliferação e sobrevivência de células cancerosas. Como um canal iônico nodal em redes de sinalização excitatória, CACNA1H é frequentemente investigado para dissecar vias dependentes da entrada de cálcio e o remodelamento do conjunto de canais (channelome).
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO T-type Ca++ CP α1H (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CACNA1H em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CACNA1H, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CACNA1H na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína T-type Ca++ CP α1H.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CACNA1H para a investigação da sinalização de T-type Ca++ CP α1H, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CACNA1H críticos para a função T-type Ca++ CP α1H
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CACNA1H para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo T-type Ca++ CP α1H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo T-type Ca++ CP α1H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CACNA1H. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo T-type Ca++ CP α1H Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR T-type Ca++ CP α1H (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CACNA1H para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CACNA1H definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.