Svs5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423227

概要

Svs5は、精嚢分泌タンパク質5（seminal vesicle secretory protein 5：Svs5）をコードしており、雄性副生殖腺の分泌物および射精後の環境に関連するマウス生殖管タンパク質です。Svsファミリーのタンパク質は、細胞外タンパク質ネットワークとの相互作用やタンパク質分解による再構築を介して、精液の凝固、精子の保護、精子機能の調節といった過程に関与すると考えられています。Svs5は関連する精嚢タンパク質の一部ほど詳細には解明されていないものの、その発現プロファイルから、アンドロゲン制御下の遺伝子プログラム、生殖生理、ならびに雄の生殖能力表現型に影響する因子の研究において重要です。副生殖腺分泌タンパク質の制御異常は、マウスモデルにおける生殖能力低下の機序や生殖管生物学の理解に手がかりを与えます。

Svs5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSvs5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Svs5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Svs5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Svs5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Svs5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Svs5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Svs5の機能に不可欠なSvs5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Svs5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Svs5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSvs5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Svs5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Svs5 HDRプラスミド（m）および Svs5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSvs5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSvs5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。