SURF-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423220

Descripción general

Surf2 codifica SURF-2, una proteína nuclear conservada del clúster génico surfeit que se ha vinculado al control fundamental de la expresión génica. SURF-2 participa en la regulación transcripcional dependiente de la ARN polimerasa II y en procesos asociados a la cromatina que influyen en la homeostasis celular. La alteración de las redes reguladoras asociadas a SURF-2 puede afectar la proliferación, las respuestas al estrés y los programas de diferenciación, lo que convierte a Surf2 en un nodo útil para estudiar el mantenimiento del genoma y la amortiguación transcripcional. Se ha observado una expresión alterada de los genes del clúster surfeit en múltiples contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda la investigación mecanística de Surf2 en estados de expresión génica desregulada.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SURF-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Surf2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Surf2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Surf2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SURF-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Surf2 para la investigación de la señalización de SURF-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Surf2 críticos para la función de SURF-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Surf2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SURF-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SURF-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Surf2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SURF-2 (m) y el plásmido HDR SURF-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Surf2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Surf2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.