Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423071

Panoramica

Il gene murino **Sod3** codifica la superossido dismutasi extracellulare (SOD3), un enzima secreto dipendente da Cu/Zn che catalizza la dismutazione dell’anione superossido in perossido di idrogeno e ossigeno, contribuendo così a modulare l’omeostasi redox nella matrice extracellulare e alla superficie cellulare. Limitando la modificazione ossidativa di lipidi e proteine e preservando la biodisponibilità dell’ossido nitrico, SOD3 influenza la segnalazione vascolare, il reclutamento delle cellule infiammatorie e il rimodellamento della matrice extracellulare. Alterazioni dell’attività di SOD3 sono associate a fenotipi guidati dallo stress ossidativo rilevanti per la biologia cardiopolmonare e vascolare, inclusi processi quali disfunzione endoteliale, fibrosi e infiammazione cronica. Queste caratteristiche rendono **Sod3** un nodo chiave per studiare la gestione extracellulare delle ROS e le reti di segnalazione regolate dal redox nei modelli murini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Sod3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Sod3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Sod3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Superoxide Dismutase 3/SOD3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Sod3 per lo studio della segnalazione di Superoxide Dismutase 3/SOD3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Sod3 critici per la funzione di Superoxide Dismutase 3/SOD3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Sod3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Sod3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Sod3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Sod3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.