Plasmide Double Nickase (m) STC1: sc-423182-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) STC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide STC1 Double Nickase (m) et le plasmide STC1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Stc1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: STC1 Antibody (1A3): sc-293435
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) STC1 | sc-423182-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) STC1 | sc-423182-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La stanniocalcine 1 (STC1), codée par le gène murin *Stc1*, est une glycoprotéine sécrétée impliquée dans l’homéostasie du calcium et du phosphate, ainsi que dans une régulation paracrine plus large de la physiologie tissulaire. STC1 module les réponses cellulaires au stress et les programmes de survie, notamment la fonction mitochondriale, la gestion du stress oxydatif et l’adaptation métabolique, et a été associée à des contextes de signalisation tels que les voies liées à l’hypoxie. Au cours du développement et dans les tissus adultes, STC1 contribue à la biologie vasculaire et épithéliale via des effets sur la prolifération, la différenciation et des processus liés à la barrière. Une expression dérégulée de STC1 a été rapportée dans des modèles d’inflammation, de fibrose, de lésions ischémiques et en biologie des cancers, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de la signalisation du microenvironnement et des réseaux transcriptionnels d’adaptation au stress.
STC1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Stc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Stc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Stc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Stc1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.