Partículas Lentivirales de Activación (h) Sox-5: sc-401854-LAC

SOX5 codifica el factor de transcripción Sox-5, miembro de la familia HMG-box relacionada con SRY, que se une al ADN y configura programas de expresión génica específicos de linaje. En células humanas, Sox-5 contribuye a la organización del patrón del desarrollo y a los procesos de diferenciación, incluidas las redes transcripcionales condrogénicas y neuronales, al coordinar la actividad de potenciadores (enhancers) y la regulación dependiente de la cromatina. Su actividad se entrecruza con vías que gobiernan el compromiso del destino celular y la maduración, lo que convierte a SOX5 en un nodo útil para estudiar los circuitos reguladores durante el desarrollo y la homeostasis tisular. La expresión desregulada de SOX5 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con estados transcripcionales alterados descritos en diversos contextos patológicos, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos del desequilibrio en la regulación génica.

Las partículas de activación lentiviral Sox-5 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SOX5 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Sox-5 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SOX5, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Sox-5. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SOX5 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.