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Sox-5CRISPR激活质粒(h) | sc-401854-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Sox-5CRISPR激活质粒(h2) | sc-401854-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SOX5 编码转录因子 Sox-5,它属于 SOX 家族成员,通过 HMG 盒结构域与 DNA 结合,在发育过程和组织稳态维持中协调谱系特异性的基因表达程序。在人类细胞中,Sox-5 通过调控增强子活性并与其他转录调控因子协同作用,参与调节软骨发生与神经发生,从而影响分化、增殖以及细胞命运决定。SOX5 相关的转录网络与控制细胞外基质组织和神经元成熟的通路相交汇,使其活性与影响组织结构建成和神经回路形成的过程相联系。SOX5 表达或功能失调已被认为与发育障碍以及癌症相关的转录重编程有关,凸显其作为研究基因型到表型关系关键节点的价值。
Sox-5 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOX5的表达。
Sox-5 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOX5基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOX5转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Sox-5表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOX5位点,并能够研究内源性位点上依赖于Sox-5的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOX5表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Sox-5通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。