Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) SNAP 25: sc-423048-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)SNAP 25 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SNAP 25 (m) y el plásmido de doble nickasa SNAP 25 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Snap25. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SNAP 25 Anticuerpo (SP12): sc-20038
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) SNAP 25 | sc-423048-NIC | 20 µg | $410.00 |
Snap25 codifica la proteína asociada a sinaptosomas 25 (SNAP25), un componente central del complejo SNARE neuronal que impulsa el acoplamiento de las vesículas sinápticas y la fusión de membranas desencadenada por calcio durante la liberación de neurotransmisores. Al asociarse con sintaxina y VAMP/sinaptobrevina, SNAP25 regula la exocitosis presináptica, la plasticidad sináptica a corto plazo y el reciclaje de vesículas dependiente de la actividad en circuitos excitatorios e inhibitorios. La señalización dependiente de SNAP25 se cruza con vías que controlan la excitabilidad neuronal y el desarrollo de redes, lo que convierte a Snap25 en un locus ampliamente utilizado para estudiar los mecanismos de transmisión sináptica en modelos murinos. La alteración de la expresión de SNAP25 o de la función de SNARE se ha vinculado a fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos en estudios genéticos y funcionales, lo que respalda su relevancia para investigar la disfunción de circuitos.
SNAP 25 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Snap25 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Snap25. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Snap25. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Snap25 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.