Slp2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405977
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Slp2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Slp2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Slp2 Anticuerpo (C-4): sc-393847
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Slp2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405977 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SYTL2 codifica la proteína 2 similar a sinaptotagmina (Slp2), un efector de Rab que vincula las vesículas secretoras con la membrana plasmática mediante interacciones con fosfolípidos mediadas por dominios C2 y actividad de unión a Rab. Slp2 contribuye a la exocitosis regulada y a eventos de acoplamiento/cebado (docking/priming) de vesículas que influyen en el tráfico de membranas, el recambio de receptores y la secreción compartimentalizada en diversos tipos celulares. A través de su función en el tráfico dependiente de Rab, SYTL2 puede afectar la dinámica de señalización, la organización del citoesqueleto y los programas de motilidad celular. La expresión o función alteradas de reguladores del tráfico vesicular como SYTL2 se han asociado con secreción desregulada y fenotipos invasivos en cáncer y otras enfermedades en las que se remodelan las vías de transporte de membrana.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Slp2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SYTL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SYTL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SYTL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Slp2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SYTL2 para la investigación de la señalización de Slp2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SYTL2 críticos para la función de Slp2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SYTL2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Slp2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Slp2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SYTL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Slp2 (h) y el plásmido HDR Slp2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SYTL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SYTL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.