SETD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-433485-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SETD2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SETD2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase SETD2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Setd2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SETD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-433485-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SETD2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-433485-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Setd2 de camundongo codifica a SETD2, a única metiltransferase responsável pela trimetilação de H3K36 (H3K36me3) em cromatina transcrita ativamente, conectando o alongamento da transcrição à regulação epigenética. Essa marca coordena o processamento de RNA co-transcricional, o reparo de incompatibilidades (mismatch) no DNA e a estabilidade do genoma, além de favorecer a comunicação cruzada com vias de resposta a danos no DNA durante estresse replicativo. Estados de cromatina dependentes de SETD2 influenciam o splicing alternativo e o recrutamento de fatores de reparo em locais de quebras de dupla fita. A desregulação da atividade de SETD2 e do padrão de H3K36me3 está associada à biologia tumoral e a programas de diferenciação alterados, tornando Setd2 um alvo-chave para estudos mecanísticos em epigenética e manutenção do genoma.
SETD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Setd2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Setd2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Setd2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Setd2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.