SAPK4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400423

Descripción general

MAPK13 codifica la quinasa 4 activada por estrés (SAPK4), una quinasa de serina/treonina de la familia p38 MAPK que transduce señales inflamatorias y de estrés ambiental en respuestas transcripcionales y posranscripcionales. SAPK4 contribuye a la regulación de la señalización asociada a citocinas, a programas de diferenciación celular y al control dependiente del contexto de la apoptosis y la proliferación mediante la fosforilación de efectores aguas abajo. Como parte de la red más amplia de MAPK, MAPK13/SAPK4 se conecta con vías que configuran las respuestas inmunitarias innatas y la biología epitelial. La desregulación de la señalización de p38 MAPK, incluida la actividad de MAPK13, se ha relacionado con fisiopatología inflamatoria y procesos asociados al cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la señalización por estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SAPK4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAPK13 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAPK13 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAPK13 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SAPK4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAPK13 para la investigación de la señalización de SAPK4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MAPK13 críticos para la función de SAPK4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAPK13 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SAPK4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SAPK4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAPK13. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SAPK4 (h) y el plásmido HDR SAPK4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAPK13 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAPK13 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.