Plásmido Doble Nickase (h) RNMT: sc-417964-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)RNMT consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RNMT (h) y el plásmido de doble nickasa RNMT (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a RNMT. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RNMT Anticuerpo (3H3-1D12): sc-517112
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) RNMT | sc-417964-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) RNMT | sc-417964-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La metiltransferasa de guanina-7 del ARN (RNMT) es la subunidad catalítica del complejo metiltransferasa de la caperuza del ARNm que instala la caperuza de N7‑metilguanosina (m7G) en los transcritos de la ARN polimerasa II. Esta modificación de la caperuza es esencial para el procesamiento co-transcripcional del ARNm, la exportación nuclear, el inicio de la traducción y la protección frente a la degradación exonucleolítica, lo que vincula la actividad de RNMT con el control global de los programas de expresión génica. La función de RNMT se integra con las vías de transcripción y de procesamiento de ARN y ayuda a coordinar la señalización asociada al crecimiento y a la respuesta al estrés mediante efectos sobre la estabilidad de los transcritos y el rendimiento traduccional. La desregulación del capado del ARNm y de la traducción dependiente de la caperuza se ha asociado con estados proliferativos alterados y firmas oncogénicas de expresión génica, lo que convierte a RNMT en un nodo útil para estudios mecanísticos del metabolismo del ARN en contextos relevantes para la enfermedad.
RNMT El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus RNMT en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de RNMT. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de RNMT. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con RNMT alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.