REEP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427671
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- REEP6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico REEP6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:REEP6 Anticorpo (H-9): sc-393569
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
REEP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427671 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Reep6 codifica a proteína 6 intensificadora da expressão de receptores (REEP6), um membro da família REEP implicado na modelagem do retículo endoplasmático tubular e na coordenação do tráfego de proteínas na via secretora inicial. Em células de camundongo, a REEP6 está associada à curvatura de membrana e à organização de subdomínios do RE que sustentam o processamento e o transporte eficientes de proteínas transmembrana, com efeitos a jusante sobre a homeostase celular e as respostas ao estresse. A REEP6 é altamente relevante para estudos de biologia neuronal e sensorial, pois proteínas da família REEP têm sido associadas a processos que mantêm compartimentos de membrana especializados e a proteostase. A desregulação da arquitetura do RE e de vias de tráfego envolvendo proteínas REEP é frequentemente investigada no contexto de neurodegeneração e disfunção do sistema sensorial, dando suporte a investigações mecanísticas em modelos relevantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO REEP6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Reep6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Reep6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Reep6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína REEP6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Reep6 para a investigação da sinalização de REEP6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Reep6 críticos para a função REEP6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Reep6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo REEP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo REEP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Reep6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo REEP6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR REEP6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Reep6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Reep6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.