RASAL1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422603

개요

Rasal1은 활성형 Ras-GTP를 비활성형 Ras-GDP로 전환하는 과정을 촉진해 Ras 구동 신호를 억제하는 Ras GTPase-활성화 단백질인 RASAL1을 암호화합니다. RASAL1은 하위의 RAF–MEK–ERK 및 PI3K–AKT 경로 활성을 조절함으로써 세포 증식, 생존, 분화 프로그램에 영향을 미치며, 상피 및 간엽 표현형에 대해서는 맥락 의존적인 효과를 포함합니다. RASAL1의 기능 또는 발현 변화는 여러 조직에서 성장 조절의 이상 및 섬유화성 재형성과 연관되어 왔으며, 이는 마우스 모델에서 신호 항상성과 질병 관련 세포 재프로그래밍을 연구하는 데 있어 그 중요성을 뒷받침합니다. 이러한 특성 때문에 Rasal1은 Ras 경로의 피드백과 전사 조절 네트워크 및 세포외기질(ECM) 조절 네트워크 간의 교차 신호(cross-talk)를 해부하는 데 유용한 핵심 노드로 활용될 수 있습니다.

RASAL1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rasal1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rasal1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rasal1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 RASAL1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 RASAL1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rasal1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• RASAL1 기능에 중요한 Rasal1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rasal1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• RASAL1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 RASAL1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rasal1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  RASAL1 HDR 플라스미드 (m) 및 RASAL1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rasal1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rasal1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.