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Pygopus 2双切口酶质粒(h) | sc-402894-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Pygopus 2双切口酶质粒(h2) | sc-402894-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PYGO2 编码 Pygopus 2,这是一种核内共激活因子,是经典 Wnt/β-连环蛋白转录复合物的核心组成部分。通过与 β-连环蛋白、BCL9/9L 以及染色质相关因子的相互作用,Pygopus 2 有助于将 Wnt 信号与染色质调控及转录控制程序相耦联,从而调节增殖、分化和干细胞样状态。PYGO2 的活性与对 Wnt 靶基因位点的表观遗传调控以及更广泛的转录网络相关,这些网络参与细胞周期推进和谱系特化。PYGO2 表达失调或 Wnt 通路过度激活常在肿瘤生物学与发育障碍研究中被关注,因此 PYGO2 是进行通路解析的一个有用节点。
Pygopus 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PYGO2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PYGO2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PYGO2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PYGO2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。