Plásmido Doble Nickase (m) Progesterone Receptor: sc-422214-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Progesterone Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Progesterone Receptor (m) y el plásmido de doble nickasa Progesterone Receptor (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Pgr. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Progesterone Receptor Anticuerpo (A-2): sc-398898
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Progesterone Receptor | sc-422214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Progesterone Receptor | sc-422214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen **Pgr** del ratón codifica el receptor de progesterona, un receptor nuclear de hormonas activado por ligando que actúa como factor de transcripción para coordinar la expresión génica dependiente de la progesterona. Tras la unión de la hormona, PGR regula la accesibilidad de la cromatina y programas transcripcionales que se solapan con redes de correceptores y vías de señalización que controlan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas inflamatorias. En los tejidos reproductivos, PGR es clave para la receptividad uterina, la implantación, la decidualización y el desarrollo de la glándula mamaria, conectando las señales endocrinas con la remodelación tisular. La desregulación de la señalización de **Pgr** y los cambios en el equilibrio de isoformas del receptor se utilizan ampliamente como rasgos experimentales en modelos de infertilidad, biología endometrial y tumorigénesis sensible a hormonas.
Progesterone Receptor El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Pgr en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Pgr. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Pgr. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Pgr alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.