Plasmide CRISPR/Cas9 KO PRKCDBP (h): sc-407370

Présentation

PRKCDBP (protein kinase C delta binding protein) est une protéine adaptatrice cytosolique impliquée dans la signalisation associée à PKCδ, où elle influence des voies dépendantes de la phosphorylation qui régulent la progression du cycle cellulaire, l’apoptose et les réponses au stress. Cette protéine a été associée à la modulation de programmes transcriptionnels et au contrôle des points de contrôle (checkpoints), en intégrant des signaux en amont issus de cascades de kinases qui orientent les décisions cellulaires de croissance et de survie. Des altérations de l’expression de PRKCDBP ont été rapportées dans de multiples contextes tumoraux, ce qui soutient son étude dans les mécanismes de contrôle de la prolifération, les réponses aux dommages de l’ADN et les réseaux associés aux suppresseurs de tumeurs. Ces propriétés font de PRKCDBP une cible pertinente pour disséquer les dépendances de signalisation et les phénotypes spécifiques au contexte dans des modèles cellulaires humains.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PRKCDBP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PRKCDBP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PRKCDBP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PRKCDBP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PRKCDBP.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PRKCDBP pour l'étude de la signalisation de PRKCDBP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de PRKCDBP essentiels à la fonction de PRKCDBP
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PRKCDBP pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le PRKCDBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PRKCDBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PRKCDBP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le PRKCDBP plasmide HDR (h) et le PRKCDBP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PRKCDBP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PRKCDBP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.