Plásmido Doble Nickase (m) Prickle2: sc-433985-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Prickle2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Prickle2 (m) y el plásmido de doble nickasa Prickle2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Prickle2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Prickle2 | sc-433985-NIC | 20 µg | $410.00 |
La proteína Prickle2 de ratón codifica un componente central de la rama de polaridad celular planar (PCP) de la señalización Wnt y actúa como un andamio que ayuda a organizar complejos proteicos asimétricos en la corteza celular. PRICKLE2 contribuye a comportamientos celulares polarizados, como el crecimiento de neuritas, el desarrollo de sinapsis y la dinámica coordinada del citoesqueleto, mediante interacciones con Dishevelled y otros factores relacionados con la PCP. En el sistema nervioso, Prickle2 favorece la conectividad neuronal y la maduración de los circuitos, procesos que se solapan con la señalización del calcio, la remodelación de actina y el tráfico vesicular. Estudios genéticos y funcionales vinculan la alteración de PRICKLE2 con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para la investigación mecanística del desarrollo cerebral y la biología sináptica.
Prickle2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Prickle2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Prickle2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Prickle2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Prickle2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.