Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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prefoldin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423658
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- prefoldin 3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico prefoldin 3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: prefoldin 3 Anticuerpo (D-5): sc-390524
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
prefoldin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423658 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Vbp1 codifica prefoldina 3, un componente cocochaperón de la maquinaria tipo prefoldina que respalda la homeostasis de las proteínas citosólicas al ayudar al plegamiento y la estabilización de determinadas proteínas cliente. La prefoldina 3 contribuye a redes de proteostasis vinculadas a la organización del citoesqueleto, el ensamblaje de complejos macromoleculares y la coordinación con vías de chaperonas que limitan el mal plegamiento proteico bajo estrés celular. A través de estos procesos, la actividad de Vbp1 puede influir en la progresión del ciclo celular, la adaptación al estrés y el equilibrio entre el plegamiento y la degradación de proteínas. La desregulación de las vías asociadas a chaperonas es relevante en modelos de estrés proteotóxico y neurodegeneración, donde una capacidad de plegamiento y un control de calidad alterados pueden modificar fenotipos asociados a la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO prefoldin 3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vbp1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vbp1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vbp1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína prefoldin 3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vbp1 para la investigación de la señalización de prefoldin 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Vbp1 críticos para la función de prefoldin 3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vbp1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido prefoldin 3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido prefoldin 3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vbp1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR prefoldin 3 (m) y el plásmido HDR prefoldin 3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vbp1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vbp1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.