POGK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412865-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- POGKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase POGK (h) e o Plasmídeo Double Nickase POGK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POGK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:POGK Anticorpo (F-1): sc-515752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
POGK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412865-NIC | 20 µg | $410.00 |
POGK (elemento transponível pogo derivado com domínio KRAB) codifica uma proteína nuclear derivada de uma transposase do tipo pogo e acredita-se que contribua para a regulação do estado da cromatina e da transcrição mediada pela ligação ao DNA. A presença de um domínio KRAB sugere o potencial recrutamento de complexos correpressores associados a KAP1/TRIM28, vinculando o POGK à formação de heterocromatina e ao controle epigenético da expressão gênica. A regulação alterada de fatores contendo KRAB é amplamente relevante para a estabilidade do genoma, programas de desenvolvimento e transições de estado celular, tornando o POGK um alvo útil para estudos mecanísticos de repressão transcricional e organização da cromatina. Investigar a perturbação de POGK pode ajudar a esclarecer como proteínas derivadas de transposases são reaproveitadas em redes regulatórias humanas e como esses mecanismos se intersectam com a desregulação transcricional associada a doenças.
POGK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POGK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POGK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POGK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POGK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.