pNPP Substrate Buffer

El tampón de sustrato pNPP (p-nitrofenilfosfato) es un componente crucial utilizado en diversos ensayos enzimáticos en la investigación bioquímica y de biología molecular. Este tampón facilita la detección y cuantificación de la actividad enzimática mediante la conversión de pNPP en p-nitrofenol por la acción de enzimas específicas. En investigación, el tampón de sustrato pNPP se emplea habitualmente en ensayos diseñados para medir la actividad de enzimas fosfatasas. Las fosfatasas catalizan la hidrólisis de los grupos fosfato de los sustratos, y su actividad puede cuantificarse controlando la liberación de p-nitrofenol, que produce un color amarillo tras la desfosforilación. Este cambio colorimétrico es fácilmente detectable mediante técnicas espectrofotométricas, lo que permite una cuantificación precisa de la actividad enzimática. Además, el tampón de sustrato pNPP se utiliza en ensayos de cribado de alto rendimiento para identificar inhibidores o activadores de enzimas fosfatasas. Al medir la tasa de producción de p-nitrofenol en presencia de diversos compuestos, los investigadores pueden identificar moléculas que modulan la actividad de la fosfatasa, lo que permite comprender mejor las vías de señalización celular y las posibles dianas.