Date published: 2026-7-21

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PMP22 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422323-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • PMP22O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase PMP22 (m) e o Plasmídeo Double Nickase PMP22 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Pmp22. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PMP22 Anticorpo (G-6): sc-515199
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    PMP22 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-422323-NIC
    20 µg
    $410.00

    A proteína 22 da mielina periférica (PMP22), codificada pelo gene murino *Pmp22*, é uma glicoproteína de membrana tetraspânica altamente enriquecida em células de Schwann e na mielina compacta, onde ajuda a regular a composição e a estabilidade da membrana de mielina, bem como a condução nervosa periférica. A PMP22 participa de vias de tráfego de membranas e de proteostase, incluindo o controle de qualidade no RE (retículo endoplasmático) e a renovação endossômica–lisossômica, ligando sua abundância à homeostase da mielina e a programas de diferenciação das células de Schwann. Alterações na dosagem de PMP22 ou seu mau dobramento estão fortemente associadas a fenótipos de neuropatia periférica, tornando *Pmp22* um ponto-chave para estudar a mielinização, as interações axônio–glia e a sinalização de resposta ao estresse no sistema nervoso periférico.

    PMP22 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Pmp22 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Pmp22. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Pmp22. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Pmp22 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.