Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110γ (h): sc-401043
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PI 3-kinase p110γ Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PI 3-kinase p110γ, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PI 3-kinase p110γ Antibody (D-12): sc-166365
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110γ (h) | sc-401043 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PIK3CG code pour la sous-unité catalytique p110γ de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K) de classe IB, un médiateur clé de la signalisation des phosphoinositides induite par les GPCR dans les cellules hématopoïétiques et d’autres types cellulaires. La PI3K p110γ phosphoryle des lipides phosphatidylinositol afin de produire du PIP3, favorisant des programmes de survie dépendants d’AKT, le remodelage du cytosquelette et la chimiotaxie dirigée via des effecteurs en aval tels que PDK1, mTOR et des régulateurs des petites GTPases. Cette voie intègre les signaux issus des récepteurs des chimiokines, des récepteurs du complément et des médiateurs inflammatoires pour contrôler l’activation des leucocytes, leur migration et l’explosion oxydative. Une signalisation PIK3CG dérégulée a été impliquée dans des réponses inflammatoires aberrantes et des dysfonctionnements des cellules immunitaires, et elle est également étudiée dans le contexte des interactions tumeur–système immunitaire et de la signalisation du microenvironnement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PI 3-kinase p110γ (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PIK3CG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PIK3CG, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PIK3CG à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PI 3-kinase p110γ.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PIK3CG pour l'étude de la signalisation de PI 3-kinase p110γ, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PIK3CG essentiels à la fonction de PI 3-kinase p110γ
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PIK3CG pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PI 3-kinase p110γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PI 3-kinase p110γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PIK3CG. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PI 3-kinase p110γ plasmide HDR (h) et le PI 3-kinase p110γ (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PIK3CG pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PIK3CG définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.