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PAK5慢病毒激活颗粒(h) | sc-404073-LAC | 200 µl | $455.00 |
PAK5(p21 激活激酶 5;PAK7)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,作为 Rho 家族 GTP 酶的下游效应分子发挥作用,将 RAC1/CDC42 信号与细胞骨架重塑、细胞极性以及应激响应通路整合在一起。它调控肌动蛋白动态以及与微管相关的过程,从而影响神经突起生长、囊泡运输和生存信号;并且据报道在特定情境下与 MAPK 和 PI3K/AKT 网络活性存在关联。PAK5 的表达或信号失调与细胞运动性改变和侵袭性表型有关,并已在神经生物学及癌症相关信号程序中得到研究。这些特性使 PAK5 成为在人类模型系统中解析由激酶驱动的细胞结构重塑及转录响应的有用靶点。
PAK5 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PAK5 表达。
PAK5 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PAK5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PAK5表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PAK5 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。