Plásmido Doble Nickase (r) p53: sc-437318-NIC
- Especies Diana: rat
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (r)p53 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa p53 (r) y el plásmido de doble nickasa p53 (r2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a . Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (r) p53 | sc-437318-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (r2) p53 | sc-437318-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
p53 de rata es un factor de transcripción supresor tumoral central que salvaguarda la integridad genómica al coordinar la detección del daño en el ADN con la detención del ciclo celular, la senescencia y la apoptosis. Tras el estrés genotóxico, p53 integra señales de las vías ATM/ATR y CHK1/CHK2 para modular programas transcripcionales que controlan los puntos de control, la reparación del ADN y la señalización apoptótica mitocondrial. Su actividad está estrictamente regulada por retroalimentación negativa con MDM2/MDM4 y moldeada por modificaciones postraduccionales que ajustan su estabilidad y su selectividad por promotores. La alteración de la vigilancia dependiente de p53 se asocia estrechamente con la transformación oncogénica, una tolerancia al estrés alterada y respuestas inflamatorias y metabólicas desreguladas en modelos relevantes para enfermedad.
p53 El plásmido de doble nicasa (r) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus en líneas celulares rat. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de . Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de . Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.