Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p120 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400943-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p120O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase p120 (h) e o Plasmídeo Double Nickase p120 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CTNND1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p120 Anticorpo (6H11): sc-23873
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p120 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400943-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p120 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400943-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTNND1 codifica a p120-catenina (p120), uma proteína com repetições armadillo que se liga às caderinas clássicas e as estabiliza nas junções aderentes, regulando a adesão célula–célula e a integridade da barreira epitelial. Ao modular a renovação (turnover) das caderinas, a p120 influencia o remodelamento das junções, a dinâmica do citoesqueleto e a sinalização das GTPases da família Rho, que coordena a polaridade e a motilidade celulares. CTNND1 também interage com vias responsivas a Wnt/β-catenina e a fatores de crescimento por meio de seus papéis na homeostase das junções aderentes e na regulação transcricional via Kaiso. A desregulação da função de CTNND1/p120 e a sinalização alterada nas junções estão associadas a organização epitelial anormal e fenótipos invasivos, estudados tanto na biologia do câncer quanto em distúrbios do desenvolvimento.
p120 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CTNND1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CTNND1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CTNND1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CTNND1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.