OTUB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413099

Visão geral

OTUB2 (deubiquitinase OTU, ligação ao aldeído de ubiquitina 2) codifica uma desubiquitinase do tipo protease de cisteína que edita sinais de ubiquitina para regular a estabilidade proteica e a amplitude da sinalização. Ao clivar preferencialmente ligações específicas de cadeias de ubiquitina, a OTUB2 influencia vias dependentes de ubiquitina que controlam a proteostase, as respostas a danos no DNA e cascatas de sinalização adaptativas ao stress. Alterações na atividade de OTUB2 têm sido associadas à desregulação da homeostase da ubiquitina observada em múltiplos contextos de doença, incluindo programas de sinalização oncogénica e a patobiologia inflamatória. Por isso, a OTUB2 é frequentemente estudada pelo seu impacto no crosstalk entre ubiquitinação, controlo transcricional e decisões de sobrevivência celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OTUB2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene OTUB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do OTUB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do OTUB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OTUB2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de OTUB2 para a investigação da sinalização de OTUB2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) OTUB2 críticos para a função OTUB2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos OTUB2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OTUB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OTUB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus OTUB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OTUB2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OTUB2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia OTUB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo OTUB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.