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NRAMP 2双切口酶质粒(h) | sc-418176-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NRAMP 2双切口酶质粒(h2) | sc-418176-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC11A2 编码 NRAMP2(DMT1),这是一种质子偶联的二价金属转运蛋白,可介导二价铁以及其他过渡金属离子跨内体膜和质膜进入细胞。NRAMP2 支持转铁蛋白依赖的内体铁释放,并与铁还原酶和铁外排机制协同参与全身铁的处理,从而与铁稳态、氧化应激平衡及代谢调控相关。SLC11A2 活性异常与铁代谢障碍有关,包括小细胞性贫血和组织铁过载等表型;在神经退行性变和炎症等研究背景中也受到关注,因为金属转运可调节细胞易损性。在人类细胞中,NRAMP2 的功能与内吞作用、溶酶体金属回收以及铁响应性基因调控等通路相交汇。
NRAMP 2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC11A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC11A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC11A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC11A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。