NK-2R Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403149

Descripción general

TACR2 codifica el receptor humano de neuroquinina 2 (NK-2R), un GPCR de clase A que se activa por taquicininas como la neuroquinina A y se acopla principalmente a la señalización de Gq/11. La activación del receptor estimula la fosfolipasa Cβ, con producción downstream de inositol trifosfato/diacilglicerol, movilización de Ca²⁺ intracelular y activación de las vías de PKC/MAPK, configurando programas transcripcionales y contráctiles. NK-2R se expresa en músculo liso, tejidos gastrointestinales y respiratorios, y en poblaciones neuronales selectas, donde regula la motilidad, el tono de las vías respiratorias y la señalización inflamatoria neurogénica. La desregulación de la señalización de TACR2 se ha vinculado con una respuesta alterada del músculo liso y con la modulación de circuitos inflamatorios, lo que respalda su estudio en modelos de hiperreactividad de las vías respiratorias tipo asma, dismotilidad gastrointestinal y vías de neuropéptidos relacionadas con el dolor.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NK-2R (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TACR2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TACR2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TACR2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NK-2R.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TACR2 para la investigación de la señalización de NK-2R, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TACR2 críticos para la función de NK-2R
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TACR2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NK-2R CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NK-2R CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TACR2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NK-2R (h) y el plásmido HDR NK-2R (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TACR2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TACR2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.