Ninjurin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421898

Descripción general

Ninj1 codifica Ninjurina-1, una molécula de adhesión de superficie celular inducida por lesión nerviosa que modula las interacciones célula–célula y la comunicación entre neuronas, glía y células inmunitarias infiltrantes. Ninjurina-1 participa en procesos vinculados a la regeneración axonal, el tráfico de leucocitos y la señalización inflamatoria, con conexiones descritas con respuestas asociadas a NF-κB y la activación de células mieloides. En sistemas de ratón, la expresión de Ninj1 se estudia con frecuencia en el contexto de daño tisular, neuroinflamación y remodelación mediada por macrófagos, donde una regulación alterada puede influir en las respuestas a la lesión. Estas propiedades hacen de Ninjurina-1 un nodo útil para analizar cómo se entrecruzan la adhesión y la inflamación en la fisiopatología del sistema nervioso y de tejidos periféricos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ninjurin-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ninj1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ninj1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ninj1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ninjurin-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ninj1 para la investigación de la señalización de Ninjurin-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ninj1 críticos para la función de Ninjurin-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ninj1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ninjurin-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ninjurin-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ninj1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ninjurin-1 (m) y el plásmido HDR Ninjurin-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ninj1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ninj1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.