Neuron navigator 2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429641

Descripción general

Nav2 codifica neuron navigator 2, una proteína asociada al citoesqueleto enriquecida en neuronas, implicada en la extensión de neuritas, la guía axonal y la migración neuronal mediante la coordinación de la dinámica de los microtúbulos y el comportamiento del cono de crecimiento. En el sistema nervioso de ratón, tanto en desarrollo como maduro, NAV2 se vincula a procesos que moldean la formación de circuitos neuronales, incluidos el establecimiento de la polaridad y el crecimiento dirigido en respuesta a señales de guía. Las vías asociadas a NAV2 alteradas se han estudiado en el contexto de fenotipos del neurodesarrollo y disfunción del sistema nervioso, donde la conectividad alterada y el patrón de los axones son características centrales. Como resultado, Nav2 es una diana útil para investigar mecanismos de morfogénesis neuronal y remodelación del citoesqueleto en modelos celulares relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Neuron navigator 2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nav2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nav2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nav2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Neuron navigator 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nav2 para la investigación de la señalización de Neuron navigator 2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nav2 críticos para la función de Neuron navigator 2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nav2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nav2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Neuron navigator 2 (m) y el plásmido HDR Neuron navigator 2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nav2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nav2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.