Particules Lentivirales d'Activation (m) Neuregulin-1/NRG1: sc-431734-LAC

Le gène murin **Nrg1** code la Neureguline-1 (NRG1), un facteur de croissance de type EGF qui transmet principalement son signal via les récepteurs tyrosine kinases **ERBB3/ERBB4** afin d’activer les voies **PI3K–AKT**, **MAPK/ERK** et d’autres programmes en aval associés. La signalisation **NRG1–ERBB** régule les décisions de destin cellulaire, la prolifération, la migration et la survie, avec des rôles majeurs dans le développement neuronal, la plasticité synaptique et la myélinisation via la communication neurone–glie. Dans les tissus périphériques, NRG1 contribue à la biologie épithéliale et cardiaque en influençant la différenciation et les voies de signalisation sensibles au stress. Une expression ou une signalisation NRG1 dérégulée a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, à des processus démyélinisants et à l’activation de voies oncogéniques, ce qui motive des études mécanistiques dans des modèles murins.

Les particules d'activation lentivirales Neuregulin-1/NRG1 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Nrg1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Neuregulin-1/NRG1 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Nrg1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Neuregulin-1/NRG1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Nrg1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.